Вскоре после начала лечения инфекционных заболеваний антибиотиками были отмечены случаи устойчивости к ним бактерий. В настоящее время штаммы бактерий с множественной лекарственной устойчивостью выделяют главным образом в больницах.
Это прежде всего неферментирующие грамотрицательные бациллы, которые проявляют как естественную, так и приобретенную трудно устранимую устойчивость к множественным антибиотикам и дезинфицирующим средствам. Открытие новых, эффективных и безопасных веществ, которые предотвращают неблагоприятные инфекции, крайне необходимо для обеспечения альтернативных возможностей терапии.
В связи с этим возрастает интерес к лекарственным средствам природного происхождения, в том числе к эфирным маслам. Особенно важно то, что к их компонентам не возникает антибактериальной устойчивости несмотря на то, что они активны против многих бактериальных штаммов. Целью нашего исследования было оценить антибактериальную активность in vitro масла тимьяна против штаммов A.
baumannii и P. aeruginosa, обладающих множественной лекарственной устойчивостью при помощи диско-дифузионного метода и метода макроразведения. Штаммы были изолированы от пациентов, госпитализированных в 2013-2014 годах. Антибактериальную активность in vitro масла тимьяна оценивали диско-диффузионным методом.
Диаметр зон ингибиции роста для масла в разных концентрациях, применяемых против A. baumannii, составлял от 7 до 44 мм. Масло тимьяна проявляло низкую активность против штаммов P. aeruginosa. В отношении изолятов A.
baumannii испытания методом серийных разведений подтвердили высокую активность масла тимьяна, выраженную в значениях минимальной ингибирующей концентрации (МИК) в диапазоне от 0,25 до 2 мкл/мл. Полученные результаты свидетельствуют о необходимости дальнейших исследований антибактериальной активности эфирных масел, особенно против бактерий с множественной лекарственной устойчивостью.
Целебные свойства эфирных масел, продуктов вторичного метаболизма масляных растений известны на протяжении веков.
Несмотря на долгую историю их использования, химический состав эфирных масел не анализировали до девятнадцатого века, когда разработка хроматографических методов позволила исследователям исследовать растительные продукты гораздо более подробно, но только методы хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией смогли обеспечить более совершенный анализ (1).
В химическом отношении масла представляют собой смеси углеводов, спиртов, альдегидов, кетонов, а также эфиров и эфирных производных обоих терпенов (главным образом моно- и сесквитерпенов) и пропилбензола.
Конкретный химический состав эфирного масла зависит от вида растения, но соотношения различных компонентов варьируют в зависимости от климата, условий выращивания, стадии вегетации, а также от того, какая часть растения используется (корни, корневища, травы, листья , цветы, фрукты, семена или кора).
Богатый состав эфирных масел определяет их чрезвычайно широкий диапазон биологической активности, в том числе активность против бактерий, вирусов и грибов, которая в основном зависит от природы ведущего химического компонента. Эфирные масла, содержащие фенолы (тимол и карвакрол), эвгенол и циннамальдегид, проявляют самую сильную антибактериальную активность.
Масла обладают липофильными свойствами, которые позволяют им быстро проникать в клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану, что приводит к повреждению клетки.
Эфирные масла мешают работе транспортных белков, что приводит к утечке компонентов бактериальных клеток, ингибирует метаболизм водорода и образование АТФ и влияет на цитоплазматические ферменты, что в конечном итоге вызывает лизис клеток (2-4). Вышеупомянутая активность эфирных масел и их основных компонентов имеет значительный терапевтический потенциал при лечении инфекций.
Антиоксидантные, иммуностимулирующие и противовоспалительные свойства масел одинаково важны (5).Выдающимся достижением 20-го века стало открытие антибиотиков, которые произвели революцию в лечении инфекционных заболеваний. К сожалению, вскоре после их введения в клиническую практику стала отмечаться резистентность бактерий к антимикробным агентам.
Недавно было подтверждено прогрессирующее повышение лекарственной устойчивости среди патогенных микроорганизмов, что отрицательно сказывается на результатах лечения инфицированных пациентов.
Среди бактериальных штаммов в настоящее время можно выделить следующие группы микроорганизмов со множественной лекарственной устойчивостью: MDR (multidrug-resistant, со множественной лекарственной устойчивостью), XDR (extensively drug-resistant, с широкой лекарственной устойчивостью) и PDR (с устойчивостью ко всем антимикробным агентам).
Микроорганизмы со множественной лекарственной устойчивостью чаще всего встречаются в больничной среде, где они могут вызывать серьезные внутрибольничные инфекции, особенно в отделениях интенсивной терапии, ожоговой терапии, хирургических, гематологических и онкологических (6). Это прежде всего неферментирующие грамотрицательные бациллы, принадлежащие к видам Acinetobacter (A.
) baumannii или Pseudomonas (P.) aeruginosa. Микроорганизмы, которые могут выжить при низком содержании питательных веществ, заселяют больничную среду, в том числе санитарные объекты, вентиляцию и медицинское оборудование, в основном респираторы, ингаляторы и венозные или мочевые катетеры (7, 8).
Они инфицируют операционные раны и ожоги, тогда как в отделениях интенсивной терапии они являются преобладающими видами бактерий, которые вызывают инфекции дыхательной системы и мочевыводящих путей. Их способность образовывать биопленку способствует выживанию и колонизации респираторов и мочевых катетеров (9,10). Резистентность ко многим антибиотикам и дезинфицирующим средствам, в первую очередь приобретенным, но также и к естественным, проявляемая многими патогенами, затрудняет их уничтожение, поэтому поиск новых, эффективных и безопасных веществ, которые предотвращают такого рода инфекции, становится все более актуальным. Следует отметить, что в последнее время предметом растущего интереса стали лекарственные средства природного происхождения, в том числе эфирные масла, к компонентам которых не развивается антибактериальная устойчивость. Не исключено, что использование эфирных масел при лечении инфекций, вызванных микроорганизмами с множественной лекарственной устойчивостью, может стать мощной альтернативой синтетическим антибиотикам, эффективность которых за последнее десятилетие снизилась. В поисках соединений или веществ, которые препятствуют инфекциям или распространению инфекционных агентов в больничной среде, мы изучили влияние тимьянового масла на некоторые штаммы неферментирующих бацилл со множественной лекарственной устройчивостью.Целью исследования было оценить антибактериальную активность in vitro масла тимьяна (Oleum Thymi) против эталонных штаммов с множественной лекарственной устойчивостью A. baumannii и P. aeruginosa при помощи диско-дифузионного метода и метода макроразведения.
Материалы и методы
Мы исследовали натуральное масло тимьяна, сертифицированное в соответствии со стандартами Национального института гигиены. Исходное 100% масло серийно разбавляли в диметилсульфоксиде (ДМСО) для достижения конечных концентраций 50, 25, 12,5, 6,25 и 3,125%. Были исследованы следующие штаммы A.
baumannii: 59 клинических изолятов и эталонный штамм ATCC 19606, а также штаммы P. aeruginosa: 29 клинических изолятов и эталонный штамм ATCC 27853. Штаммы были выделены от больных, госпитализированных в 2013-2014 гг. в специализированную больницу им. Л.
Ридигера в Кракове в отделения анестезии и интенсивной терапии, ожоговой терапии, множественной травматологической помощи, ортопедии и нейроортопедии, неврологии и травм головного мозга, пластической хирургии, нефрологии, кардиологии и внутренней медицина, а также токсикологии.
Изоляты Acinetobacter baumannii культивировали из эндотрахеальных аспиратов (22 штамма), образцов крови (17), мазков из ран (12), мочи (4) и катетеров (4), тогда как изоляты P. aeruginosa культивировали из мазков из ран (11), эндотрахеальных аспиратов (9), мочи (4), мазков из уха (4) или из конъюнктивы (1). Все исследованные штаммы A. baumannii и P.
aeruginosa обладали множественной лекарственной устойчивостью. Испытывали чувствительность изолятов A. baumannii (59) к имипенему (IPM), меропенему (MEM), амикацину (AMK), гентамицину (GEN), тобрамицину (TOB), ципрофлоксацину (CIP), колистину (CST) и триметоприну/сульфаметоксазолу (SXT). Для определения чувствительности штаммов P.
aeruginosa (29) использовали следующие антибиотики: пиперациллин (PIP), пиперациллин/тазобактам (TZP), цефтазидим (CAZ), цефепим (FEP), имипенем, меропенем, азтреонам (АТМ), амикацин, гентамицин, тобрамицин, ципрофлоксацин и колистин.
Материалы и методы
Чувствительность штаммов A. baumannii и P. aeruginosa к антимикробным агентам оценивали диско-диффузионным методом и определяли минимальные ингибирующие концентрации (МИК).
Полученные результаты свидетельствуют о том, что эти изоляты следует классифицировать как обладающие множественной лекарственной устойчивостью (Рисунки 1 и 2). 
Рисунок 1Чувствительность штаммов Acinetobacter baumannii к избранным антимикробным агентам. По горизонтальной оси – антимикробный агент, по вертикальной оси – количество штаммов.
Рисунок 2
Чувствительность штаммов Pseudomonas aeruginosa к избранным антимикробным агентам. По горизонтальной оси – антимикробный агент, по вертикальной оси – количество штаммов.
Чувствительность штаммов Acinetobacter baumannii к избранным антимикробным агентамАнтибактериальную активность масла тимьяна определяли диско-диффузионным методом и методом серийных разведений для того, чтобы найти минимальную ингибирующую концентрацию, способную тормозить рост бактерий.
Изоляты инокулировали на твердую среду (триглицериновый соевый агар) и инкубировали при 35°С в течение 20 часов. Затем колонии суспендировали в 0,85% физиологическом растворе, чтобы получить эквивалент 0,5 единиц МакФарланда по мутности. Тесты на диффузию диска проводились на агаре Мюллера-Хинтона в чашках Петри диаметром 90 мм.
Бактериальные суспензии инокулировали на поверхность чашки Петри с питательной средой, а затем на эту поверхность помещали стерильные фильтровальные бумажные диски диаметром 6 мм, содержащие уменьшающиеся концентрации масла тимьяна (15 мкл). После 20 ч инкубации при 35°С измеряли диаметры зон ингибирования роста в мм.
Минимальные ингибирующие концентрации определяли методом макроразведения триптиказеино-соевом бульоне.Объемы были подобраны таким образом, чтобы объем растворителя был как можно меньшим.
Исходный раствор получали путем растворения чистого масла тимьяна в ДМСО до концентрации 16 мкл/мл, а затем делали серийные разведения в пределах от 8 мкл/мл до 0,125 мкл/мл в пробирках, содержащих 1 мл бульона. Затем к каждой пробирке добавляли 100 мкл бактериальной суспензии, эквивалентной 0,5 единицам McFarland, и инкубировали при 35°C в течение 20 часов. После этого определяли минимальную ингибирующую концентрацию (МИК, мкг/мл) как самую низкую концентрацию тимьянового масла, при которой не наблюдалось бактериального роста. Параллельно со всеми испытаниями проводили контроль бульона, масла тимьяна и роста бактерий.
Результаты
В настоящем исследовании мы изучали in vitro антимикробную активность масла тимьяна против бактериальных эталонных штаммов. Испытания проводили диско-диффузионным методом и измеряли диаметры зон ингибиции роста бактерий вокруг дисков, пропитанных маслом тимьяна.
Зоны ингибирования роста клинического штамма Acinetobacter baumannii маслом тимьяна в концентрации: A. 100% масло тимьяна; B. 50% масло тимьяна; C. 25%, 12,5%, 6,25% масло тимьяна. Сравнение чувствительности к 100% маслу тимьяна с устойчивостью к выбранным антибактериальным агентам: IPM, GEN, TOB, CIP, SXT (D).
Значения МИК масла тимьяна (мкл/мл) против клинических штаммов Acinetobacter baumannii. По горизонтальной оси – значения МИК, по вертикальной оси – количество штаммов.Таблица 1. Диаметры зон ингибиции роста Acinetobacter baumannii (клинические и эталонные штаммы) тимьяновым маслом в тестируемых концентрациях, определенные диско-диффузионным методом 
Таблица 2. Диаметры зон ингибиции роста клинических штаммов Pseudomonas aeruginosa strains growth тимьяновым маслом в тестируемых концентрациях, определенные диско-диффузионным методом 
Диаметры зон ингибиции для эталонного штамма ATCC 19606 A. baumannii варьировали от 9 до 38 мм при концентрациях масла 100, 50, 25, 12,5 и 6,25%, тогда как при концентрациях масла 100, 50 и 25% зоны ингибирования штамма АТСС 27853 P. aeruginosa составляли от 7 до 18 мм. Те же концентрации были использованы для оценки антибактериальной активности тимьянового масла против патогенов, выделенных из пациентов стационара. Наши результаты подтвердили, что антибактериальная активность масла тимьяна против изученных штаммов A. baumannii была высокой. Размер зон ингибирования составлял от 26 до 44 мм для масла тимьяна в концентрации 100%, от 19 до 30 мм для 50%, от 11 до 22 мм для 25% и от 8 до 17 мм для 12,5%. Наименьшие зоны ингибирования в диапазоне от 7 до 11 мм были получены при концентрации масла 6,25% (таблица 1). Результаты исследования восприимчивости к маслу тимьяна клинического изолята A. baumannii показаны на рисунке 3. Наше исследование показало очень низкий уровень активности тимьянового масла против тестируемых клинических штаммов P.aeruginosa. Масло тимьяна создавало зоны ингибирования роста бактерий в диапазоне от 7 до 12 мм для 11 штаммов P.aeruginosa, но оказалось, что оно полностью неактивно против восемнадцати изолятов этого патогена (таблица 2). Следующим этапом исследования было определение значений МИК масла тимьяна в различных концентрациях против штаммов A. baumannii с использованием метода серийного разведения. Полученные результаты подтвердили, что антибактериальная активность масла тимьяна, выраженная в значениях МИК, составляющих от 0,25 до 2 мкл/мл, была высокой. Было обнаружено, что МИК50 и МИК90 этих изолятов составляют 0,5 и 1 мкл/мл соответственно. Самый низкий МИК 0,25 мкл/мл наблюдался против штамма A. baumannii, в то время как значения 0,5 мкл/мл и 1 мкл/мл были обнаружены у 31 и 17 изолятов, соответственно. Только один штамм показал МИК 2 мкл мл (рисунок 4).
- Обсуждение и выводы
- Литература
- Источник
Источник: https://aromarti.ru/aktivnost-masla-timyana-oleum-thymi-protiv-bakterij-acinetobacter-baumannii-i-pseudomonas-aeruginosa-obladaucshih-mnozhestvennoj-lekarstvennoj-ustojchivostu.html
Acinetobacter (ацинетобактер) baumannii, lwoffii, spp
Ацинетобактер — род неферментирующих микроорганизмов из семейства Moraxellaceae.
-
Acinetobacter baumannii Морфология. Acinetobacter — плеоморфные короткие и округлые палочковидные бактерии, способные приобретать форму кокков при определенных условиях. Они являются аспорогенными, капсульными и неподвижными. Некоторые штаммы демонстрируют «дергающуюся» подвижность – движение рывками за счет полярно расположенных фимбрий. Фимбрии и капсула имеются не у всех представителей данного рода. В ядре бактерий содержится циркулярно замкнутая молекула ДНК. - Тинкториальные свойства. Бактерии окрашиваются по Грамму в красный цвет и располагаются в мазке парами, короткими цепочками или беспорядочными скоплениями.
- Физиологические свойства. Ацинетобактер – хемоорганотроф с окислительным метаболизмом, строгий аэроб. Этот микроб характеризуются универсальной активностью метаболизма, обеспечивающей его удивительную экологическую пластичность. В качестве источника питания ацинетобактерии используют разнообразные вещества – простые углеводы, нефть, ткани организма человека. Бактерии проявляют высокую липолитическую активность.
- Биохимические свойства. Ацинетобактер — неферментирующий микроорганизм. Он не образует индол, сероводород и оксидазу, является каталазопозитивным и оксидазонегативным. Большинство штаммов разлагают сахара с образованием кислоты.
- Культуральные свойства. Acinetobacter растут на простых питательных средах. Им не требуются факторы роста. Обычно используют для культивирования минеральные среды с единственным источником энергии – этанолом, ацетатом или лактатом. Селективная среда для ацинетобактерий — Лидс-агар1, а также хромогенный агар CHROMagar, UriSelect. Некоторые штаммы могут продуцировать слизь, бледно-желтый и светло-серый пигмент. Температурный оптимум 30—32 °С.
- Антигенные свойства. Ацинетобактер имеет капсульный К-антиген, устойчивый к нагреванию, и соматический О-антиген, вступающий в межвидовые перекрестные реакции агглютинации.
- Факторы патогенности: белки-адгезины; пили; экзотоксин – липополисахарид клеточной стенки; эндотоксин, вызывающий гибель и разрушение лейкоцитов; ферменты: фосфолипаза, ДНК-аза, сериновая протеаза, аминопептидаза, уреаза и кислая фосфатаза. Капсула подавляет эффективность фагоцитарных реакций и облегчает адгезию к эпителию, а способность к секреции бактериоцинов обеспечивает колонизацию.
- Резистентность. Ацинетобактерии устойчивы к детергентам, высушиванию и обезвоживанию. Они чувствительны к кипячению и большинству хлорсодержащих дезинфицирующих средств.
Биохимические свойства коринебактерий
Дифтерийная палочка является аэробом или факультативным анаэробом, температурный оптимум для роста 35-37 °С (границы роста 15-40 °С), оптимальная рН 7,6-7,8.
К питательным средам не очень требовательна, но лучше растет на средах, содержащих сыворотку или кровь.
Избирательными для дифтерийных бактерийявляются свернутые сывороточные среды Ру или Леффлера, рост на них появляется через 8-12 ч в виде выпуклых, величиной с булавочную головку колоний серовато-белого или желтовато-кремового цвета.
Поверхность их гладкая или слегка зернистая, на периферии колонии несколько более прозрачные, чем в центре. Колонии не сливаются, вследствие чего культура приобретает вид шагреневой кожи.
На бульоне рост проявляется в виде равномерного помутнения, либо бульон остается прозрачным, а на его поверхности образуется нежная пленка, которая постепенно утолщается, крошится и хлопьями оседает на дно.
Особенностью дифтерийных бактерий является их хороший рост на кровяных и сывороточных средах, содержащих такие концентрации теллурита калия, которые подавляют рост других видов бактерий. Это связано с тем, что С.
diphtheriae восстанавливают теллурит калия до металлического теллура, который, откладываясь в микробных клетках, придает колониям характерный темно-серый или черный цвет.
Применение таких сред повышает процент высеваемости дифтерийных бактерий.
Corynebacterium diphtheriae ферментируют глюкозу, мальтозу, галактозу с образованием кислоты без газа, но не ферментируют (как правило) сахарозу, имеют цистиназу, не имеют уреазы и не образуют индола.
По этим признакам они отличаются от тех коринеформных бактерий (дифтероидов), которые чаще других встречаются на слизистой оболочке глаза (Corynebacterium xerosus) и носоглотки (Corynebacterium pseiidodiphtheriticum) и от других дифтероидов.
В природе существуют три основных варианта (биотипа) дифтерийной палочки: gravis, intermedins и mitis. Они различаются по морфологическим, культуральным, биохимическим и другим свойствам.
Деление дифтерийных бактерий на биотипы было произведено с учетом того, при каких формах течения дифтерии у больных они выделяются с наибольшей частотой.
Тип gravis чаще выделяется от больных с тяжелой формой дифтерии и вызывает групповые вспышки.
Тип mitis вызывает более легкие и спорадические случаи заболеваний, а тип intermedius занимает промежуточное положение между ними.
Corynebacterium belfanti, ранее относимый к биотипу mitis, выделен в самостоятельный, четвертый, биотип. Его главное отличие от биотипов gravis и mitis — способность восстанавливать нитраты в нитриты. Штаммы Corynebacterium belfanti обладают выраженными адгезивными свойствами, и среди них обнаруживаются как токсигенные, так и нетоксигенные варианты.
Коринебактерии очень гетерогенна и мозаична. У возбудителей дифтерии всех трех типов обнаружено несколько десятков соматических антигенов, по которым их делят на серотипы. В России принята серологическая классификация, по которой различают 11 серотипов дифтерийных бактерий, из них 7 основных (1-7) и 4 дополнительных, редко встречающихся серотипов (8-11).
Для дифференциации дифтерийных бактерий предложены различные схемы фаготипирования. По схеме М. Д.
Крыловой с помощью набора из 9 фагов (А, В, С, D, F, G, Н, I, К) удается типировать большинство токсигенных и нетоксигенных штаммов типа gravis.
С учетом чувствительности к указанным фагам, а также культуральных, антигенных свойств и способности синтезировать корицины (бактерицидные белки) М. Д.
Corynebacterium diphtheriae проявляет большую устойчивость к низким температурам, но быстро погибает при высокой температуре: при 60 °С — в течение 15-20 мин, при кипячении — через 2-3 мин. Все дезинфицирующие вещества (лизол, фенол, хлорамин и др.) в обычно применяемой концентрации уничтожают ее за 5-10 мин.
Патогенность Corynebacterium diphtheriae определяется наличием ряда факторов.
Факторы адгезии, колонизации и инвазии
Структуры, ответственные за адгезию, не идентифицированы, однако без них дифтерийная палочка не смогла бы колонизировать клетки. Их роль выполняют какие-то компоненты клеточной стенки возбудителя. Инвазивные свойства возбудителя связаны с гиалуронидазой, нейраминидазой и протеазой.
Токсического гликолипида, содержащегося в клеточной стенке возбудителя. Он представляет собой 6,6′-диэфир трегалозы, содержащий коринемиколовую кислоту (С32Н6403) и коринемиколиновую кислоту (Сз2Н62Оз) в эквимолярных отношениях (трегалозо-6,6′-дикоринемиколат). Гликолипид оказывает разрушающее действие на клетки ткани в месте размножения возбудителя.
Экзотоксина, обусловливающего патогенность возбудителя и характер патогенеза заболевания. Нетоксигенные варианты С. diphtheriae дифтерии не вызывают.
Экзотоксин синтезируется в виде неактивного предшественника — единой полипептидной цепи с м.м. 61 кД.
Его активация осуществляется собственной бактериальной протеазой, которая разрезает полипептид на два связанные между собой дисульфидными связями пептида: А (м.м. 21 кД) и В (м.м. 39 кД).
Пептид В выполняет акцепторную функцию — он распознает рецептор, связывается с ним и формирует внутримембранный канал, через который проникает в клетку пептид А и реализует биологическую активность токсина.
Пептид А представляет собой фермент АДФ-рибозилтрансферазу, который обеспечивает перенос аденозиндифосфатрибозы из НАД на один из аминокислотных остатков (гистидина) белкового фактора элонгации EF-2. В результате модификации EF-2 утрачивает свою активность, и это приводит к подавлению синтеза белка рибосомами на стадии транслокации.
Токсин синтезируют только такие С. diphtheriae, которые несут в своей хромосоме гены умеренного конвертирующего профага. Оперон, кодирующий синтез токсина, является моноцистронным, он состоит из 1,9 тыс. пар нуклеотидов и имеет промотор toxP и 3 участка: toxS, toxA и toxB.
Участок toxS кодирует 25 аминокислотных остатков сигнального пептида (он обеспечивает выход токсина через мембрану в периплазматическое пространство бактериальной клетки), toxA — 193 аминокислотных остатка пептида А, и toxB — 342 аминокислотных остатка пептида В токсина.
Утрата клеткой профага или мутации в tox-опероне делают клетку малотоксигенной. Напротив, лизогенизация нетоксигенных С. diphtheriae конвертирующим фагом превращает их в токсигенные бактерии. Это доказано однозначно: токсигенность дифтерийных бактерий зависит от лизогенизации их конвертирующими tox-коринефагами.
Генетический анализ ряда нетоксигенных штаммов дифтерийных бактерий, проведенный с помощью меченых ДНК-зондов, несущих фрагменты tox-оперона коринефага, показал, что в их хромосомах имеются последовательности ДНК, гомологичные tox-оперону коринефага, но они либо кодируют неактивные полипептиды, либо находятся в «молчащем» состоянии, т. е. неактивны.
В связи с этим возникает очень важный в эпидемиологическом отношении вопрос: могут ли нетоксигенные дифтерийные бактерии превращаться в токсигенные в естественных условиях (в организме человека), подобно тому, как это происходит in vitro? Возможность подобного превращения нетоксигенных культур коринебактерий в токсигенные с помощью фаговой конверсии была показана в опытах на морских свинках, куриных эмбрионах и белых мышах. Однако происходит ли это в ходе естественного эпидемического процесса (и если происходит, то как часто), пока установить не удалось.
В связи с тем, что дифтерийный токсин в организме больных оказывает избирательное и специфическое воздействие на определенные системы (поражаются в основном симпатико-адреналовая система, сердце, сосуды и периферические нервы), то очевидно, он не только угнетает биосинтез белка в клетках, но и вызывает другие нарушения их метаболизма.
Биологические пробы на животных. Внутрикожное заражение морских свинок фильтратом бульонной культуры дифтерийных бактерий вызывает у них некроз в месте введения.
Одна минимальная смертельная доза токсина (20-30 нг) убивает морскую свинку весом 250 г при подкожном введении на 4-5-й день.
Наиболее характерным проявлением действия токсина является поражение надпочечников, они увеличены и резко гиперемированы.
Заражение куриных эмбрионов. Дифтерийный токсин вызывает их гибель.
Заражение культур клеток. Дифтерийный токсин вызывает отчетливый цитопатический эффект.
Метод твердофазного иммуноферментного анализа с использованием меченных пероксидазой антитоксинов.
Использование ДНК-зонда для непосредственного обнаружения tox-оперона в хромосоме дифтерийных бактерий.
Однако наиболее простым и распространенным способом определения токсигенности дифтерийных бактерий является серологический — метод преципитации в геле. Суть его состоит в следующем. Полоску стерильной фильтровальной бумаги размером 1,5 х 8 см смачивают антитоксической противодифтерийной сывороткой, содержащей 500 АЕ в 1 мл, и наносят на поверхность питательной среды в чашке Петри.
Чашку подсушивают в термостате 15-20 мин. Испытуемые культуры засевают бляшками по обе стороны от бумажки. На одну чашку засевают несколько штаммов, один из которых, заведомо токсигенный, служит контролем.
Чашки с посевами инкубируют при 37 °С, результаты учитывают через 24-48 ч.
Вследствие встречной диффузии в геле антитоксина и токсина в месте их взаимодействия образуется четкая линия преципитации, которая сливается с линией преципитации контрольного токсигенного штамма.
Эпидемиология
Единственным источником заражения является человек — больной, выздоравливающий или здоровый бактерионоситель. Заражение происходит воздушно-капельным, воздушно-пылевым путем, а также через различные предметы, бывшие в употреблении у больных или здоровых бактерионосителей: посуда, книги, белье, игрушки и т. п.
В случае инфицирования пищевых продуктов (молоко, кремы и т. п.) возможно заражение алиментарным путем. Наиболее массивное выделение возбудителя имеет место при острой форме заболевания. Однако наибольшее эпидемиологическое значение имеют лица со стертыми, нетипичными формами заболевания, так как они часто не госпитализируются и выявляются далеко не сразу.
Особую роль в эпидемиологии дифтерии играют здоровые бактерионосители. В условиях спорадической заболеваемости именно они являются основными распространителями дифтерии, способствуя и сохранению возбудителя в природе. Средняя продолжительность носительства токсигенных штаммов несколько меньше (около 2 мес), чем нетоксигенных (около 2-3 мес).
Причина формирования здорового носительства токсигенных и нетоксигенных дифтерийных бактерий раскрыта не до конца, так как даже высокий уровень антитоксического иммунитета не всегда обеспечивает полное освобождение организма от возбудителя. Возможно, определенное значение имеет уровень антибактериального иммунитета. Первостепенное эпидемиологическое значение имеет носительство токсигенных штаммов дифтерийных бактерий.
Симптомы дифтерии
К дифтерии восприимчивы люди любого возраста. Возбудитель может проникнуть в организм человека через слизистые оболочки различных органов или через поврежденную кожу. В зависимости от локализации процесса различают дифтерию зева, носа, гортани, уха, глаза, половых органов и кожи. Возможны смешанные формы, например дифтерия зева и кожи и т. п.
Инкубационный период — 2-10 дней. При клинически выраженной форме дифтерии в месте локализации возбудителя развивается характерное фибринозное воспаление слизистой оболочки. Токсин, вырабатываемый возбудителем, сначала поражает эпителиальные клетки, а затем близлежащие кровеносные сосуды, повышая их проницаемость.
В выходящем экссудате содержится фибриноген, свертывание которого приводит к образованию на поверхности слизистой оболочки серовато-белого Цвета пленчатых налетов, которые плотно спаяны с подлежащей тканью и при отрыве от нее вызывают кровотечение. Следствием поражения кровеносных сосудов может быть развитие местного отека.
Источник: https://dimelli.ru/orynebaterium-spp-lehenie/
Инфекции, вызываемые acinetobacter: лечение, симптомы
Вид Acinetobacter может вызывать гнойные инфекции в любой системе организма; эти бактерии часто являются оппортунистами у госпитализированных пациентов.
.
Acinetobacter встречается повсеместно и способна выжить на сухих поверхностях в течение месяца, увеличивая вероятность колонизации пациентов и заражения медицинского оборудования. Существует много разновидностей Acinetobacter, но A. baumannii (АВ) считают причиной приблизительно 80% инфекций.
Болезни, вызываемые Acinetobacter (АВ)
Инфекции АВ, как правило, выявляют у пациентов, госпитализированных в критическом состоянии. Уровень смертности, связанный с инфекцией АВ, составляет 19-54%.
Наиболее часто поражаются органы дыхания.
Acinetobacter часто колонизирует места трахеостомы и может вызывать внебольничный бронхиолит и трахеобронхит у здоровых детей и трахеобронхит у взрослых с ослабленным иммунитетом.
Приобретенные в больнице пневмонии, вызванные Acinetobacter, часто многодолевые и осложненные. Характерны вторичная бактериемия и септический шок, что предопределяет неблагоприятный прогноз.
Вид Acinetobacter может также вызывать гнойные инфекции в любой системе организма, включая легкие, мочевыводящие пути, кожу и мягкие ткани; возможна бактериемия.
Редко эти микроорганизмы вызывают менингит (прежде всего после нейрохирургических процедур), целлюлит или флебит у пациентов с постоянным венозным катетером, глазные инфекции, врожденный или спровоцированный протезом клапана эндокардит, остеомиелит, септический артрит и абсцессы поджелудочной железы и печени.
Значимость выделенных изолятов из клинических образцов определить трудно,потому что они часто представляют собой колонизацию.
Факторы риска. Факторы риска развития инфекции зависят от следующих факторов -это приобретенная в больнице, внебольничная, резистентность ко многим лекарствам.
| Приобретенная в больнице |
|
| Внебольничная форма |
|
| Резистентность ко многим лекарствам |
|
Резистентность к препарату. В настоящее время появились штаммы АВ с резистентностью ко многим лекарствам.
Распространение штаммов АВ в отделениях интенсивной терапии было связано с медицинским персоналом, у которых выявлена высокая колонизация данного микроорганизма, а также с зараженным оборудованием общего использования и зараженными растворами для парентерального питания.
Лечение Acinetobacter
- Обычно, эмпирическая комбинированная лекарственная терапия при тяжелых инфекциях.
Для пациентов с установленным инородным телом (например, катетер, шов), удаление инородного тела плюс местная обработка обычно существенны.
Трахеобронхит после эндотрахеальной интубации может пройти благодаря только гигиене легких. Пациенты с осложненным течением заболевания должны лечиться антибиотиками с последующей санацией.
У АВ давно регистрируется множественная резистентность к антибактериальным препаратам. Инфекция АВ, вызванная устойчивостью ко многим препаратам, может быть резистентна к >3 классам антибактериальных препаратов; некоторые изоляты являются стойкими ко всем.
Возможные варианты включают карбапенем (например, меропенем, имипенем, дорипенем), ингибитор β-лактамазы/β-лактам (например, ампициллин/сульбактам), колистин или фторхинолон плюс аминогликозид, рифампицин или оба препарата. У сульбактама (ингибитор β-лактамазы) имеется свойственная ему бактерицидная активность против многих штаммов инфекции АВ данного типа.
Тигециклин, антибиотик класса глицилциклинов также эффективен; однако сообщалось о пределах его эффективности и появлении резистентности во время терапии.
Инфекции легких (при среднетяжелых формах) могут реагировать на монотерапию. Раневые инфекции также можно лечить одним препаратом, например миноциклиномом. Тяжелые инфекции лечат комбинированно, как правило, имипенемом или ингибитором β-лактама/β-лактамазы в сочетании с аминогликозидами.
Чтобы предотвратить распространение возбудителя, необходимо применять меры по предотвращению контакта (ручная стирка, барьер) и соответствующие меры по проветриванию и гигиене, связанной с пациентами, колонизированными или зараженными инфекцией такого рода.
Источник: https://www.sweli.ru/zdorove/meditsina/infektsionnye-bolezni/infektsii-vyzyvaemye-acinetobacter-lechenie-simptomy.html
Ацинетобактер лечение
Наталия
Золотистый стафилококк 10*5 и Acinetobacter baumannii 10*2 в носоглотке.
Сдали бак посев.В носу стафилококк (aureus) 10*5 и ацинетобактер.В зеве стафилококк (aureus) 10 в 3 степени.Посев сдавали т.к. сын (5 лет) стал очень часто болеть и каждый раз с бак осложнениями. И готовимся к удалению аденоидов ( 3ст, тугоухость 1 ст, острый евстахиит).
К врачу с анализами идем на след неделе. Знаю, много споров по поводу посевов, флоры и лечения. Поэтому хочу заранее послушать опыт других, если была аналогичная картина при посеве, что говорили вам врачи, чем лечили и лечили ли.Почитала…
Читать далее →
Zhannа
Бактерии Proteus mirabilis и Acinetobacter spp.
Во время последней Б (ЗБ) у меня в бакпосеве из влагалища было обнаружено Proteus mirabilis. Был назначен антибиотик цефтриаксон, который мне не подошел (аллергия), назначили свечи гексикон.
Через некоторое время я снова сдала бакпосев, Proteus mirabilis не было, а было обнаружено Acinetobacter spp.
Обе эти бяки являются грамотрицательными бактериями, которые могут находится в половых путях и в то же время, могут вызывать воспалительное процессы.
Мазок и ПЦР были чистые. Proteus mirabilis — представитель нормальной, условно-патогенной микрофлоры кишечника человека. Может вызывать…
Читать далее →
Елена
А если доплер не улучшится,что дальше?
Добрый день девочки! Сейчас налаживаю кровоток по доплеру — базальные артерии единичные локус; спиральные вообще не виз-ся((( далее под кат эндик всего 5,5, назначили лечение на 2мес — пью Актовегин ,Флебодиа, свечи Лонгидаза, физио и Фемостон 2/10.
Еще репр-г поставила ХЭ в неакт.течении .По узи в матке расшир.полость с содержимым, М.скудные , прошу прощения , темного цвета((. Сдала сама бакпосев из ЦК, высеялся какой то Ацинетобактер в оч.мал.степени, менее 10и2. В общем прошел цикл, М.пообильнее но оно и понятно -…
Читать далее →
Марьюшка
Сентябрь тоже в пролете
Я писала, что август, на который я возлагала все надежды с января месяца, не оказался месяцем зачатия. Начала курс лечения хр.тонзиллита (и продолжаю). Не рискнула планировать.
Помимо тонзиллита, меня постоянно беспокоили тянущие боли внизу живота после похода по-маленькому.
Началось все давно, еще в мае где-то, но 2 раза анализы мочи были идеальные. Пила Канефрон по совету врача, он сказал, больше ничего не нужно делать, мол, пройдет.
Когда стало болеть после каждого похода в туалет , я отправилась к урологу (до…
Читать далее →
Здоровье — от трех до шести лет
Обсудите вашу тему в сообществе, узнайте мнение активных пользователей Бэбиблога
Перейти в сообщество
Анна
Краткие выводы о тактике лечения ангины
Краткие выводы о тактике лечения ангины А.Демкин, врач, СПб, 2009Особенности антибиотикотерапии острых тонзиллитов. Страница 2
1. Не всем больным с ангиной (острым тонзиллитом) требуется назначение антибиотиков 2.
Предположительный или подтвержденный диагноз стрептококковой ангины требует назначения антибиотиков. 3.
Диагноз стрептококковой ангины может быть предположительнопоставлен по клинической картине заболевания на основании критериев Centor, и подтвержден с помощью микробиологической диагностики или экспресс тестов типа Strep A. 4.
Основная цель назначения антибиотиков при стрептококковой ангине – предупреждение развития ранних и поздних осложнений. Антибиотики не оказывают значительного воздействия на сроки и выраженность клинических проявлений ангины. 5. Лучшие результаты (при отсутствии непереносимости – 90 % всех пациентов) и максимальная эрадикация… Читать далее →
Источник: https://www.BabyBlog.ru/theme/acinetobakter-lechenie
Acinetobacter • ru.knowledgr.com
Acinetobacter (ключ NEET к bak трижды) является родом грамотрицательных бактерий, принадлежащих более широкому классу Gammaproteobacteria. Разновидности Acinetobacter не подвижны и отрицательны оксидазой, и происходят в парах под усилением.
Они — важные организмы почвы, где они способствуют минерализации, например, ароматические соединения. Разновидности Acinetobacter — ключевой источник инфекции в истощенных пациентах в больнице, в особенности разновидности Acinetobacter baumannii.
Этимология
Acinetobacter — сложное слово с научного греческого языка [α + + (ία)], имея в виду 'неподвижный прут'. Первый элемент acineto-является несколько барочным предоставлением греческой морфемы -; более общая транслитерация на английском языке — akineto-, как в страдающем акинезией.
Описание
Разновидности рода Acinetobacter являются строго аэробными, неферментативными, грамотрицательными бациллами. Они показывают преобладающе coccobacillary морфологию на неотборном агаре. Пруты преобладают в жидких СМИ, особенно во время раннего роста.
Морфология разновидностей Acinetobacter может быть довольно переменной в Запятнанных граммом человеческих клинических экземплярах и не может использоваться, чтобы дифференцировать Acinetobacter от других частых причин инфекции.
Большинство напряжений Acinetobacter, кроме части напряжения A. lwoffii, растет хорошо на агаре Макконки (без соли). Хотя официально классифицировано как не ферментирование лактозы, они часто частично волнуют лактозу, когда выращено на агаре Макконки. Они отрицательны оксидазой, неподвижны, и обычно отрицательны нитратом.
Бактерии рода Acinetobacter, как известно, формируют внутриклеточные включения polyhydroxyalkanoates под определенными условиями окружающей среды (например, отсутствие элементов, такими как фосфор, азот или кислород, объединенный с чрезмерной поставкой углеродных источников).
Таксономия
Род Acinetobacter включает 27 законно названный и 11 неназванных (геномных) разновидностей.
Однако, потому что обычная идентификация в клинической лаборатории микробиологии еще не возможна, они разделены и сгруппированы в три главных комплекса:
- Комплекс Acinetobacter calcoaceticus-baumanii: негемолитическое окисление глюкозы, (A. baumannii может быть определен OXA-51, печатающим)
,
- Acinetobacter lwoffii: отрицательный глюкозой негемолитический
- Acinetobacter haemolyticus: гемолитический
С предстоящим из нового метода в таксономии, такой как 16 rDNA упорядочивающий, MALDI и целый упорядочивающий геном, идентификация более четкая для рода Acinetobacter.
Идентификация
Различные виды бактерий в этом роду могут быть определены, используя денитрификацию лактозы флюоресценции, чтобы счесть количество кислоты произведенным метаболизмом глюкозы. Другой надежный тест на идентификацию на уровне рода — хромосомное испытание преобразования ДНК. В этом испытании, естественно компетентный триптофан auxotrophic мутант Acinetobacter baylyi
(BD4 trpE27) преобразован с полной ДНК предполагаемого одинокого Acinetobacter, и смесь преобразования покрыта металлом на мозговом сердечном агаре вливания.
Рост тогда получен после инкубации в течение 24 ч в 30°C, обшив металлическим листом на Acinetobacter минимальном агаре (AMA), и выведя в 30°C в течение 108 ч. Рост на АМЕ указывает, что положительное преобразование оценивает, и подтверждает одинокое как члена рода Acinetobacter. E.
coli HB101 и A. calcoaceticus MTCC1921T могут использоваться в качестве отрицательных и надежных управлений, соответственно.
Среда обитания
Разновидности Acinetobacter широко распределены в природе, и обычно происходят в почве. Они могут выжить на сырых и сухих поверхностях, включая в окружающей среде больницы. Некоторые напряжения были изолированы от продовольствия. В питьевой воде они, как показывали, соединили бактерии, которые иначе не формируют совокупности.
Патология
В здоровых людях колонии Acinetobacter на коже коррелируют с низкой заболеваемостью аллергиями; Acinetobacter, как думают, защитный аллергией.
A. baumannii — вторая обычно изолированная неволнующаяся бактерия в людях.
В людях с ослабленным иммунитетом несколько разновидностей Acinetobacter могут вызвать опасные для жизни инфекции. Такие разновидности также показывают относительно широкую степень антибиотического сопротивления.
Acinetobacter часто изолируется при внутрибольничных инфекциях и особенно распространен в отделениях интенсивной терапии, где и спорадические случаи и эпидемические и местные случаи распространены. A.
baumannii — частая причина внутрибольничной пневмонии, особенно 'последнего начала' связанная с вентилятором пневмония. Это может вызвать различные другие инфекции, включая кожу и раневые инфекции, бактериемию и менингит, но A. lwoffi главным образом ответственен за последнего. A.
baumannii может выжить на человеческой коже или высушить поверхности в течение многих недель.
Эпидемиологические доказательства указывают, что биофильмы Акинетобэктера играют роль в инфекционных заболеваниях, таких как периодонтит, инфекции кровотока и инфекции мочевых путей, из-за способности бактерий колонизировать медицинские устройства проживания (такие как катетеры).
Антибиотические маркеры сопротивления часто переносятся плазмидой, и плазмиды, существующие в напряжениях Акинетобэктера, могут быть переданы другим патогенным бактериям горизонтальным переносом генов.
Способность разновидностей Акинетобэктера придерживаться поверхностей, сформировать биофильмы и показать антибиотическое сопротивление и перенос генов мотивирует исследование факторов, ответственных за их распространение.
Начиная с начала войны в Ираке больше чем 700 американских солдат были заражены A. baumannii. Умерли четыре гражданских лица, проходящие лечение тяжелых болезней в Центральном армейском госпитале Уолтера Рида в Вашингтоне, округ Колумбия, переданных инфекциях A. baumannii и.
В Ландштуле Региональный Медицинский центр, Американская военная больница в Германии, другом гражданском лице при лечении, 63-летней немецкой женщине сократили то же самое напряжение войск инфицирования A. baumannii в средстве и также умерли. Эти инфекции, кажется, были приобретены больницей. Основанный на genotyping A.
baumannii, культивированного от пациентов до начала войны в Ираке, солдаты, вероятно, заразились инфекциями, в то время как госпитализировано на лечение в Европе.
Лечение
Разновидности Acinetobacter врожденно стойкие ко многим классам антибиотиков, включая пенициллин, хлорамфеникол, и часто aminoglycosides. Об устойчивости к фторхинолонам сообщили во время терапии, которая также привела к увеличенному сопротивлению другим классам препарата, установленным через активную утечку препарата.
О значительном увеличении антибиотического сопротивления в напряжениях Acinetobacter сообщила CDC, и carbapenems признаны золотым стандартом и лечением последней инстанции.
Разновидности Acinetobacter необычны в этом, они чувствительны к sulbactam; sulbactam обычно используется, чтобы запретить бактериальную бету-lactamase, но это — пример антибактериальной собственности самого sulbactam.
В ноябре 2004 CDC сообщила о растущем числе инфекций кровотока A. baumannii в пациентах в военных медицинских учреждениях, в которых военнослужащие ранили в области Ирака/Кувейта во время Операционной иракской Свободы, и в Афганистане во время Операции Того, чтобы выносить рассматривали Свободу. Большинство из них было множественным лекарственным стойким.
Среди одного набора изолирует от Центрального армейского госпиталя Уолтера Рида, 13 (35%) были восприимчивы к imipenem только, и два (4%) были стойкими ко всем проверенным наркотикам. Один антибактериальный агент, colistin (polymyxin E), использовался, чтобы лечить заражения множественным лекарственным стойким A.
baumannii; однако, антибактериальное тестирование восприимчивости на colistin не было выполнено на, изолирует описанный в этом отчете. Поскольку A.
baumannii может выжить на сухих поверхностях в течение максимум 20 дней, они представляют высокую угрозу распространения и загрязнения в больницах, потенциально помещая и других пациентов с ослабленным иммунитетом в опасности для стойких к препарату инфекций, которые являются часто смертельными и, в целом, дорогими, чтобы рассматривать.
В
докладах предполагается, что эта бактерия восприимчива к терапии фага.
Антисмысл подавления активности гена oligomers в форме, названной спрягаемым пептидом phosphorodiamidate morpholino oligomers, как также сообщали, затормозил рост в тестах, выполненных у животных, зараженных устойчивым к антибиотикам A. baumanii.
Стерильная техника
Частота внутрибольничных инфекций в британских больницах побудила Национальную службу здравоохранения (NHS) исследовать эффективность анионов для воздушной очистки, найдя, что повторные бортовые acinetobacter инфекции в опеке были уничтожены установкой отрицательного воздуха ioniser — зараженность упала на ноль.
Естественное преобразование
Бактериальное преобразование включает передачу ДНК от дарителя бактерии получателя через прошедшую жидкую среду. Бактерии получателя должны сначала войти в специальное психологическое состояние, которое называют компетентностью получить ДНК дарителя. A.
calcoaceticus вызван стать компетентным для естественного преобразования растворением постоянной культуры в новую питательную среду. Компетентность постепенно теряется во время длительного экспоненциального роста и в течение периода после входа в устойчивое состояние.
Поднятая ДНК может использоваться, чтобы возместить убытки ДНК или как средство обменять генетическую информацию горизонтальным переносом генов. Естественное преобразование в A.
calcoaceticus может защитить от воздействия повреждающих ДНК условий в окружающей среде этих бактерий, как это, кажется, имеет место для других бактериальных разновидностей, способных к преобразованию.
Внешние ссылки
- Союз для благоразумного использования антибиотиков
- Страница Acinetobacter sp ADP1 Генома
- CycSim: метаболическая модель
Acinetobacter baylyi adp1
- AcinetoCyc: база данных Pathway Genome для
Acinetobacter baylyi adp1
Дополнительные материалы для чтения
Источник: http://ru.knowledgr.com/00383338/Acinetobacter
Загрузка...
